1. Một plasmid vòng có kích thước 10.000 bp được cắt bởi hai enzyme giới hạn, A và B, tạo ra dải băng 3000 bp và 2000 bp trên gel agarose. Khi chỉ được cắt với một enzyme, chỉ có một băng 5000 bp được nhìn thấy.
Nếu vị trí cắt giới hạn đầu tiên của enzyme A (A1) có mặt tại nu thứ 100, thứ tự các vị trí còn lại (A2, B1 và B2) là:
A. 3100, 5100, 8100
B. 8100, 3100, 5100
C. 5100, 3100, 8100
D. 8100, 5100, 3100
2. Dưới đây là một số enzyme giới hạn cùng với trình tự nucleotide đặc hiệu được nhận biết bởi các enzyme này:
Enzyme cắt giới hạn | Trình tự nhận biết |
Alul | 5’-AGCT-3’ |
Haelll | 5’-GGCC-3' |
Hindlll | 5’-AAGCTT-3’ |
BamHI | 5’-GGATCC-3’ |
Notl | 5’-GCGGCCGC-3’ |
Giả sử rằng bạn muốn cắt nhiễm sắc thể số 1 của ruồi giấm Drosophila bằng các enzyme giới hạn này. Nếu giả sử rằng hệ gen Drosophila bao gồm 30% A, 30% T, 20% G và 20% C, khoảng cách trung bình giữa mỗi trình tự nhận biết này là bao nhiêu?
3. Các bản đồ các vị trí cắt của enzyme cắt giới hạn R ở người bình thường và bệnh nhân Alzheimer được vẽ dưới đây. Giả sử đây là hội chứng lặn. Các mẫu DNA từ trẻ em (C) và cha mẹ (F và M) được phân tích điện di gel, tiếp theo là Southern blot sử dụng đầu dò có nhãn phóng xạ như trong hình. Kết quả thu được như dưới đây. Những đứa trẻ nào sẽ phát triển bệnh?
A. C1 và C3
B. C2 và C4
C. C5 và C6
D. Tất cả những người trên
E. Không có trường hợp nào ở trên.
4. Đặc điểm của 2 plasmids pKanR-GFP và pBS được mô tả dưới đây. pKanR-GFP có operon promoter yếu mã hóa cho protein huỳnh quang màu xanh. KanR là gen có kích thước 500 bp giúp kháng kháng sinh kanamycin. pBS chứa gen LacZ (có promoter riêng) và 1 vị trí đa nhân dòng (MCS)nằm trong gen LacZ. TetR là gen có kích thước 1500bp giúp kháng kháng sinh tetracycline. Bạn được yêu cầu nhân dòng operon gfp chứa pKanR-GFP, vào pBS để tạo chủng vi khuẩn kháng tetracycline sinh trưởng có màu xanh.
Một thí nghiệm cắt giới hạn kép được thực hiện bằng cách sử dụng các enzyme giới hạn Xho I và Pst I, và tạo ra các mảnh được nối với nhau bằng cách sử dụng T4 DNA ligase để tạo ra một số plasmid tái tổ hợp. Sản phẩm của thí nghiệm được biến nạp các tế bào E.coli DH5a và đem nuôi cấy trong môi trường LB. Bạn cần thực hiện bổ sung điều gì để có thể chọn và sàng lọc cho các chủng có chứa plasmid mong muốn? Giải thích mỗi phép thực hiện của bạn.
Đáp án:
Câu 1
Câu 2
Post a Comment